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想要選擇合適的液相色譜柱就看看這些吧
點(diǎn)擊次數:2146 更新時(shí)間:2020-08-12
現代高效液相色譜分析中,液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩定性。但是現在市場(chǎng)上色譜柱種類(lèi)繁多,不同類(lèi)型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,可以看看以下內容。
柱長(cháng)及內徑的選擇
長(cháng)度的選擇:柱越長(cháng),總柱效越高(n值越大),柱越長(cháng),分析時(shí)間也越長(cháng)。250—300mm是普遍的柱長(cháng),實(shí)驗室一半以上的工作都是采用此規格柱子,一般用來(lái)分離l0到50個(gè)組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來(lái)分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復雜樣品程序升溫分析。
內徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內徑越小柱效越高,但內徑越大,柱容量也增加,允許進(jìn)樣量就越多。當進(jìn)樣量超過(guò)柱容量時(shí),則因柱內每塊理論板內不能建立真正的平衡,將會(huì )導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現性不好。
因此對于復雜樣品需要分離,必須使用小內徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內徑大的柱子,目前實(shí)驗室使用常見(jiàn)的柱子內徑一般是4.6mm。
一般選擇原則:分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長(cháng)色譜柱使用壽命等。
現在商品化的液相色譜柱琳瑯滿(mǎn)目,根據色譜柱的參數可以給我們提供一個(gè)初步的選擇,但由于各個(gè)儀器廠(chǎng)商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇色譜柱前要好好研究色譜柱參數,仔細閱讀色譜柱說(shuō)明書(shū),才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法